發(fā)布日期:2021/07/26
革蘭氏染色法,是指細菌學(xué)中廣泛使用的一種重要的鑒別染色法。
革蘭氏染色法的染色原理
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革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、復染等四個(gè)步驟,未經(jīng)染色的細菌,由于其與周?chē)h(huán)境折光率差別甚小,故在顯微鏡下極難區別。通過(guò)結晶紫初染和碘液媒染后,在細菌細胞壁內形成了不溶于水的結晶紫與碘的復合物,再用95%乙醇脫色。經(jīng)染色后,陽(yáng)性菌呈紫色,陰性菌呈紅色,可以清楚地觀(guān)察到細菌的形態(tài)、排列及某些結構特征,從而用以分類(lèi)鑒定。
革蘭氏染色液使用注意事項
1、要用活躍生長(cháng)期的幼培養物作革蘭氏染色
2、涂片不宜過(guò)厚,以免脫色不完全造成假陽(yáng)性
3、火焰固定不宜過(guò)熱(以玻片不燙手為宜)
4、乙醇脫色是革蘭氏染色操作的關(guān)鍵環(huán)節:脫色不足,陰性菌被誤染成陽(yáng)性菌;脫色過(guò)度,陽(yáng)性菌被誤染成陰性菌。因而脫色時(shí)間一般為20-30s。
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